Введение.

В настоящее время актуальное значение приобретает развитие коневодства. Данная отрасль является важным резервом в производстве экологически безопасных продуктов, в основном, для детского и диетического питания. Конина в отличие от мяса других животных содержит мало холестерина, что является одним из факторов, определяющих ее диетическую ценность.

Значительное влияние на продуктивность животных оказывает кормление. Неполноценное кормление – основная причина снижения продуктивности и эффективности животноводства. От уровня и типа кормления, его полноценности зависит проявление генетического потенциала продуктивности, которое определяет энергию роста, живую массу и размеры животного, его экстерьер и телосложение, количественные и качественные показатели продуктивности [3, 5, 8].

Поэтому в дальнейшем увеличение производства экологически чистых продуктов коневодства большое значение имеет использование кормов высокого качества и экологически безопасных кормовых добавок.

В настоящее время в ветеринарной медицине все большее применение находят биологически активные добавки, содержащие в своем составе пробиотики, пребиотики или синбиотики. Пробиотические препараты все чаще оценивают не только по антимикробному эффекту, но и по особенностям воздействия на организм и его микробиоту при развитии аллергических реакций, аутоиммунных процессов, необходимости усиления иммунного ответа [4, 6, 7].

К одним из таких средств относится кормовая добавка ПроВетин производства ООО НТП «ВетИнКом», содержащая бактерии штаммов Bacillus subtilis, Saccharomyces cerevisiae, Trichoderma reesei. Общее количество жизнеспособных клеток в 1 г пробиотика не менее 1*10⁹ КОЕ.

Для оценки безопасности и эффективности применения кормовой добавки ПроВетин при выращивании лошадей были определены следующие задачи:

- определить оптимальную дозу кормовой добавки ПроВетин;

- установить влияние кормовой добавки ПроВетин на динамику морфобиохимических показателей крови лошадей.

Материалы и методы исследований

Опыты для установления оптимальной дозы использования пробиотиотической кормовой добавки ПроВетин были проведены на лошадях на предприятиях различной форм собственности Московской области.

Исследования были проведены на взрослых лошадях, из которых было сформировано 3 группы по 8 лошадей в каждой группе с учетом породы, возраста и живой массы методом парных аналогов. Первая группа была контрольной, где кормовую добавку не применяли. Лошади 2 и 3 групп получали дополнительно к основному рациону (ОР) кормовую добавку ПроВетин в течение 45 дней: 2 группа – 20 г на голову в сутки, 3 группа – 30 г на голову в сутки.

Группы формировали по принципу аналогов (с учетом пола, породности, возраста, живой массы, идентичности физиологического состояния).

Рационы составляли с учётом детализированных норм кормления. Условия содержания и кормления соответствовали требованиям ГОСТ Р 56508-2015.

Содержание животных и их обслуживание было одинаковым во всех группах и соответствовало внутреннему распорядку, принятому в хозяйстве. Санитарно-гигиенические, зоотехнические и ветеринарные требования в период проведения экспериментов были соблюдены. Лошадей содержали в типовых конюшнях по одной в деннике, с ежедневной прогулкой в варках. Лошади содержались в соответствующих ветеринарно-зоотехническим требованиям условиях, получали хозяйственный рацион (ОР) в соответствии с общепринятыми нормами [1].

Кровь для исследований брали у лошадей каждой группы из ярёмной вены утром до кормления перед началом опыта и через 45 дней опытного периода [2].

Гематологические исследования цельной крови проводили с использованием автоматического гематологического анализатора Abacus Junior 5 Vet. Биохимические исследования крови проводили с использова­нием полуавтоматического биохимического анализатора крови StatFax 1904+ с применением стандартизированных реактивов Vital Diagnostics Spb.

Статистическая обработка была проведена с использованием статистического анализа для Microsoft Excel. Достоверность различий между группами по количественным признакам оценивалась при помощи t-критерия Стьюдента. Различия считали статистически значимыми при Р < 0,05.

Результаты исследований и их обсуждение.

При исследовании крови лошадей на начало опыта во всех группах обнаружили умеренный лейкоцитоз (табл. 1). Количество лейкоцитов колебалось в пределах от 14,0±0,9×10⁹/л до 15,1±1,2×10⁹/л. При исследовании лейкоцитарной формулы отмечается незначительное увеличение количества лимфоцитов у лошадей контрольной группы (7,8±0,7×10⁹/л) и 1 опытной группы (8,0±0,5×10⁹/л). Такие показатели как содержание эритроцитов, гемоглобина, гематокрита, уровень тромбоцитов находились в пределах физиологической нормы для данного вида животных.

Таблица 1

Гматологические показатели крови лошадей до введения кормовой добавки ПроВетин

Примечание: * – Р ≤ 0,05

Применение кормовой добавки ПроВетин оказало положительное воздействие на гематологические показатели крови лошадей. Через 45 дней применения кормовой добавки у животных опытных групп отмечена нормализация уровня лейкоцитов относительно первоначально полученных данных. Так, в 1 опытной группе количество лейкоцитов составило 11,2±1,5×10⁹/л, во 2 группе – 10,6±1,8×10⁹/л. В контрольной группе у лошадей умеренный лейкоцитоз сохранился – количество лейкоцитов составило 14,8±1,8×10⁹/л. При анализе лейкоформулы животных всех групп содержание гранулоцитов и агранулоцитов находились в референсных диапазонах физиологической нормы. Наблюдалась тенденция к увеличению уровня гемоглобина и эритроцитов у лошадей опытных групп, получавших ПроВетин.

Таблица 2

Гематологические показатели крови лошадей через 45 дней после введения кормовой добавки ПроВетин

Примечание: * – Р ≤ 0,05

Анализ показателей, характеризующих биохимический статус крови исследуемых лошадей (табл. 3, 4) показал, что перед началом эксперимента и введения в рацион кормовой добавки содержание общего белка в сыворотке крови лошадей всех групп соответствовало нормативным значениям нижней границы без существенных межгрупповых различий. Через 45 дней опытного периода отмечена тенденция к незначительному снижению количества общего белка в сыворотке крови лошадей контрольной группы на 7% (60,9±7,2 г/л). У лошадей 2 группы, получавших кормовую добавку ПроВетин в дозе 20 г на голову, количество общего белка практически не изменилось. У животных 3 группы, получавших ПроВетин в дозе 30 г на голову, через месяц опытного периода отмечена тенденция к повышению уровня общего белка в сыворотке крови (на 16%), главным образом за счёт содержания альбуминов (на 19%). Содержание глобулинов в крови у лошадей всех групп перед началом опыта соответствовало нижним границам нормы для данного вида животных. Через 45 дней опытного периода у животных опытных групп отмечено повышение уровня глобулинов в качестве адекватного ответа на введения кормовой добавки ПроВетин (в 1 опытной группе на 9,6%, во 2 группе – на 13,4%).

Так как белки глобулиновой фракции представлены, в основном, соединениями с защитной функцией, то можно предположить, что введение в рацион кормовой добавки ПроВетин обусловило повышение защитных механизмов организма лошадей, более эффективно во 3-ой опытной группе, где ПроВетин применяли в дозе 30 г на голову.

Таблица 3

Биохимические показатели крови лошадей до введения кормовой добавки ПроВетин

Примечание: * – Р ≤ 0,05

Уровень мочевины в крови у лошадей всех групп на начало исследований соответствовал нормативным значениям без существенных межгрупповых различий. Через 45 дней опытного периода отмечена тенденция к снижению содержания этого метаболита в крови у лошадей опытных и контрольной групп, в большей степени выраженное у животных 2 группы, что коррелирует с повышением уровня общего белка в сыворотке крови и, видимо, косвенно указывает на использование аминогрупп не на синтез мочевины, а на синтез аминокислот, и в дальнейшем – белка. Вероятно, снижение уровня концентрации мочевины в крови является адаптационным механизмом, направленным на сохранение азота для синтеза белка.

Таблица 4

Биохимические показатели крови лошадей через 45 дней после введения кормовой добавки ПроВетин

Примечание: * – Р ≤ 0,05

Содержание глюкозы в крови у лошадей всех групп соответствовало нормативным значениям без существенных различий. Через 45 суток опытного периода отмечена тенденция к незначительному увеличению содержания в крови у лошадей контрольной группы на 3,7%, а у животных 1 и 2 группы – на 5,5 и 7% соответственно. Следовательно, введение кормовой добавки в течение 45 дней способствовало оптимизации энергетического обмена, более выраженного во 2 опытной группе лошадей, получавших ПроВетин в дозе 30 г на голову.

Уровень АЛТ и триглицеридов у лошадей контрольной и опытной групп до начала исследования и через 45 дней после введения кормовой добавки находился в пределах значений физиологической нормы для данного вида животных. Содержание АСТ за весь период исследования у животных контрольной и опытных групп также находилось в границах референсного уровня, но через 45 дней уровень АСТ лошадей контрольной группы увеличился на 11,5%, а у животных опытных групп незначительно снизился относительно первоначальных показателей. Уровень холестерина при анализе сыворотки крови лошадей 1 и 2 опытных групп демонстрирует тенденцию достоверного уменьшения по сравнению с контрольной группой – 3,1±0,3 ммоль/л и 3,2±0,3 ммоль/л (Р ≤ 0,05).

Заключение.

На основании проведенных исследований установлено, что применение лошадям кормовой добавки ПроВетин, бактерии штаммов Bacillus subtilis, Saccharomyces cerevisiae, Trichoderma reesei, оказало положительное воздействие на гематологический и биохимический профиль крови лошадей. В зависимости от дозы кормовой добавки ПроВетин установлена активизация защитных механизмов организма и энергетического обмена. В группе животных, получавших кормовую добавку в дозе 20 г на голову, через 45 дней от начала приема отмечено повышение уровня гемоглобина и эритроцитов относительно первоначального уровня – на 1,6% (142,4±13,9 г/л, Р ≤ 0,05) и 6,9% (9,3±0,8х10¹²/л, Р ≤ 0,05) соответственно. У лошадей, которым применяли ПроВетин в дозе 30 г на голову, через 1,5 месяца гемоглобин увеличился на 1% (146,9±12,2 г/л, Р ≤ 0,05), количество эритроцитов на 2,1% (9,0±1,4х10¹²/л), общий белок на 16% (76,6±6,0 г/л, Р ≤ 0,05), альбумины на 19% (38,4±2,6 г/л, Р ≤ 0,05). Также в опытных группах животных отмечена нормализация уровня лейкоцитов относительно первоначальных значений – в 1 группе количество лейкоцитов составило 11,2±1,5×10⁹/л, во 2 группе – 10,6±1,8×10⁹/л. В биохимическом профиле лошадей опытных групп отмечено увеличение глобулинов, что, скорее всего, свидетельствует об активизации иммунной системы и нормализации иммуноструктурного гомеостаза.

На основании вышеизложенного следует отметить, что результаты проведенного исследования позволяют рекомендовать применение взрослым лошадям кормовую добавку ПроВетин в дозе 20-30 г на голову в сутки в течение 45 суток.

Библиографический список

1. Калашников, А.П. Нормы и рационы кормления с.-х. животных. Справочное пособие / Под ред. А.П. Калашникова, В.И. Фисинина, В.В. Щеглова, Н.И. Клейменова. – М.: Россельхозакадемия, 2003. – 456 с.
2. Кондрахин, И.П. Методы ветеринарно-клинической лабораторной диагностики: справ. / И.П. Кондрахин, А.В. Архипов, В.И. Левченко, и др. – М.: КолосС, 2004. – 205 с.
3. Маннапова Р.Т., Панин А.Н., Маннапов А.Г., Гусев А.А. Иммунный статус, естественный микробиоценоз птиц и методы их оценки. – М.: Изд-во башкирского ГАУ и ВГНКИ, 2001. – 339 с.
4. Antimicrobial Compounds Produced by Bacillus spp. and Applications in Food / Baruzzi F., Quintieri L., Morea M., Caputo L. // Science against Microbial Pathogens: Communicating Current Research and Technological Advances (Vilas A.M., ed.). – Badajoz, Spain: Formatex, 2011. – P. 1102-1111.
5. Bernardeau M., Lehtinen M.J., Forssten S.D., Nurminen P.Importance of the gastrointestinal life cycle of Bacillus for probiotic functionality // J. Food Sci. Technol. 2017. V. 54.P. 2570–2584.
6. Cutting M. Bacillus probiotics // Food Microbiol. 2011.V. 28. P. 214–220.
7. Effects of Bacillus subtilis B10 spores on viability and biolo-gical functions of murine macrophages / Huang Q., Xu X., Mao Y.L. et al. // Anim. Sci. J. – 2013. – Vol. 84, No 3. – P. 247-252.
8. Effect of Feeding Bacillus subtilis natto on Hindgut Fermentation and Microbiota of Holstein Dairy Cows / Song D.J., Kang H.Y., Wang J.Q. et al. // Asian-Australasian Journal of Animal Sciences. – 2014. – Vol. 27, № 4. – P. 495-502.